一、基本情况
1974.12 |
1978.4 |
中国人民解放军舟山要塞区服兵役; |
1978.4 |
1978.8 |
浙江省富阳渔山乡务农; |
1978.9 |
1982.7 |
浙江农业大学农学系,学士; |
1982.8 |
1985.12 |
浙江农业大学基础部,助教; |
1986.1 |
1989.12 |
美国康奈尔大学植物系,博士生,博士; |
1989.12 |
1991.6 |
美国华盛顿大学生物系,博士后; |
1991.6 |
1992.6 |
北京大学生物系,博士后; |
1992.7 |
1994.6 |
北京大学生命科学学院副教授,蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室副主任,学术委员会委员; |
1994.7 |
现
在 |
北京大学生命科学学院教授,博士生导师,学术委员会委员; |
1995.9 |
1997.3 |
美国加州伯克利大学植物基因表达中心访问教授; |
1999.7 |
现
在 |
北京大学理学部学术委员会委员。 |
2000.7 |
现
在 |
教育部科学技术委员会生命科学学部委员 |
2001.7 |
现
在 |
科技部863高技术计划生物与现代农业领域专家委员会委员 |
2001.9 |
现
在 |
长江特聘教授 |
2002.5 |
现
在 |
农业部国家转基因生物安全委员会委员 |
2002.9 |
现
在 |
蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室主任 |
二、主要研究方向
1、克隆得到与豌豆短日不衰老性状相连锁并赤霉素诱导表达的PPF-1、GDA-1和AAIR基因,为揭示赤霉素在植物生长发育及衰老中的作用与地位奠定了基础。
采用cDNA差式分析方法(Representational
Difference Analysis--RDA),比较赤霉素处理前后G2豌豆细胞内基因表达的差异,发现上述基因不仅受赤霉素调控,而且具有光周期特异性,只有短日照条件下生长的豌豆才能在开花后迅速积累这些mRNA,长日照条件下几乎无这些基因产物积累。查询各大数据库的资料表明,PPF-1是一个新的基因,仅与枯草杆菌中一个营养生长期特异性表达基因在氨基酸水平上有30%左右的同源性。将PPF1基因与报告基因GFP连接后用基因枪轰击法导入洋葱根尖表皮细胞后发现,绿色荧光标记大量集中在细胞膜上。用该载体永久性转化拟南芥后发现,绿色荧光标记集中于叶绿体膜上。把该基因连接到35S启动子后面并分别按正向或反向模式导入拟南芥基因组中发现,正向表达PPF1基因,能明显延缓转基因拟南芥的开花和生长发育进程,推迟其衰老。反向表达该基因,使拟南芥中原有的同源基因失活,则明显提早转基因植物的开花期,加速植株衰老。进一步的实验表明,PPF1(+)叶片表皮上气孔保卫细胞内只检测到微量的钙离子荧光信号;反之,PPF1(-)与对照植株叶片表皮气孔保卫细胞内却检测到大量的钙离子荧光标记信号,暗示PPF1与钙离子通道的调控有关。相关的氨基酸序列分析结果还表明,PPF1与已经发表的动物与人钙离子通道蛋白序列有一定的同源性。将PPF1基因连接到动物基因启动子下游并导入到本身无内钙电流的癌细胞系中,证实转化的细胞系拥有强大的内向钙电流,表明PPF1基因可能编码了是植物体内的钙离子通道蛋白。正在对不衰老细胞特异性表达的cDNA进行体内定位杂交和体外表达研究,揭示其光周期特性、表达调控规律以及与细胞衰老的关系。我们认为,上述发现将为深入研究赤霉素调控的基因表达、研究植物个体生长发育衰老提供新的可靠的工具。(见:《中国科学》,1997,2003;Plant
Physiol.,1997;Gene,
1997;MGG,1998;《科学通报》,2001;《植物学报》,2002;The Plant Journal.,2003)
2、以陆地棉徐州142和它的无长绒无短绒突变体(fuzless-lintless,
fl)为实验材料,通过大规模分离、鉴定和研究棉花纤维伸长期相关基因,寻找用于遗传工程改良棉纤维的靶基因。陆地棉是世界上种植面积最广、产量最高的棉种,而fl突变体除了种子无毛外,在表型上与野生型(wildtype,WT)没有明显差别,为克隆纤维特异表达基因提供了绝好的背景材料。选用开花后10天(10DPA,
10 days post anthesis)、棉花纤维伸长速度最快的陆地棉纤维与fl突变体胚珠作为起始材料,用PCR-Select
cDNA Subtraction方法获得了纤维特异的cDNA减法库;从减法库随机挑取616个克隆,测序得到280个独立基因;PCR扩增出这些基因片段,用机械手点到尼龙膜上,形成Array;分别以纤维和胚珠的总cDNA为探针进行杂交,分离到172个纤维特异或高表达的基因,是阐明棉花纤维发育机制的重要分子基础。(见《植物学报》,2002;Biochemical and Biophysical Research
Communications,2002;Nucleic Acids Res.,2003)
3、牛结核杆菌多价核酸疫苗的研制与应用。已完成多个牛结核杆菌核酸苗的构建工作,克隆了MPT-64、Ag85B、ESAT-6、MPT-63和MPT-83等分泌蛋白的结构基因全序列,制备了大量无内毒素的重组表达载体pJW4303
DNA,筛选出了两组结核杆菌DNA三价苗(Ag85B+MPT-64+ESAT-6和Ag85B+MPT-83+ESAT-6)组合,对模型动物鼠的保护效率达到100%,最好的组合减菌量达到BCG阳性对照组的80-100倍,是阴性对照组的3万倍左右。首次用选出的两组三价联苗对21头牛进行了免疫和攻毒实验,剖解结果表明两组最佳组合的牛结核杆菌多价DNA疫苗对本动物牛的保护率达到75-80%。牛攻毒后剖解结果表明,核酸疫苗组的保护率为75%-80%,而阴性对照组保护效率为0,BCG阳性对照组的保护率为20%。(见:《科学通报》,2002;《中国科学》,2003;《生物化学与生物物理学报》,2003;)。
3、著有供生物类本科生、研究生使用的教科书《现代分子生物学》,约70余万字(高等教育出版社);著有《分子生物学实验技术》,21.2万字(北京大学出版社)。译有《PCR传奇》,18万字(上海科学技术出版社)和《细胞的起源》,20万字(三联出版社)。克隆了大量有重要功能的植物、微生物和昆虫基因,其中有16个全长cDNA序列被EMBL或GenBank基因文库所接收,基因文库号分别为:X78340,X94352,X96555,X95565,X96609,X92077,X92846,X95566,AF521240,AY218846,AY189968,AY207316,AY189970,AY189969,AY189971,AY189972,已向GenBank提供了166个(CB350396至CB350561)棉花纤维伸长期特异性表达的EST。
三、主要发表文章(仅列出2000年以来所发表论文)
1.
*Sheng-Jian Ji, Ying-Chun Lu, Jian-Xun Feng, Gang Wei, Jun Li,
Yong-Hui Shi, Qiang Fu, Di Liu, Jing-Chu Luo and Yu-Xian Zhu. (2003) Isolation
and Analyses of Genes Preferentially Expressed During Early Cotton Fiber
Development by Subtractive PCR and cDNA Array. Nucleic Acids Res. 31: in press.
2.
*蔡宏,田霞,呼西旦,潘怡,李国利, 庄玉辉,朱玉贤。(2003) 结核分枝杆菌四价核酸疫苗免疫原性和保护效率研究。中国科学,印刷中。
3.
苏力坦·阿巴白克力,姬生健,朱玉贤。(2003) 北非蝎昆虫毒素AaHIT1基因的原核表达和转基因研究。中国生物化学与分子生物学报,19:182-185。
4.
潘怡,蔡宏,李淑霞,李唐,朱玉贤。(2003) MPT63核酸疫苗的制备及其免疫原性。中国生物化学与分子生物学报,19:205-209。
5.
*Dayong Wang, Yunjian Xu, Qing Li, Xuemei Hao, Yanhui Su, Fangzhen
Sun, Yuxian Zhu. (2003) Transgenic expression of a putative calcium transporter
affects the time of arabidopsis flowering. The Plant Journal,33: 285-292
6.
*徐云剑,顾雪松,李珺,李晴,Peter J. Davies,朱玉贤。(2003)豌豆乙酰羟酸还原异构酶基因结构、蛋白活性分析及其调控机制研究。《中国科学》,33:19-26
7.
*潘怡,蔡宏,李淑霞,田霞,李唐,朱玉贤。(2003) 结核分枝杆菌组合DNA疫苗的免疫效果研究。《生物化学与生物物理学报》,35: 71-76。
8.
苏力坦·阿巴白克力,白勇,朱玉贤。(2003) GDA2基因的克隆、原核表达与融合蛋白的纯化。《农业生物技术学报》,11: 6-10。
9.
*Yun-Jian Xu, Da-Yong Wang, Yu-Xian Zhu (2002) Expression of the
thylakoid membrane localized PPF1 in transgenic Arabidopsis affects
chloroplast development. Acta Botanica Sinica, 41: 1314-1320。
10.
徐云剑,苏力坦·阿巴白克力,吉栩,朱玉贤。(2002)PPF1基因C端片段在大肠杆菌中的融合表达和纯化以及抗体制备。《中国生物化学与分子生物学报》,18: 594-599。
11.
蔡宏,潘怡,汪竟,朱玉贤。(2002)结核分枝杆菌MPT-64分泌蛋白在原核表达载体中的克隆,表达与鉴定。《中国人兽共患病杂志》,18(4):1-4
12.
蔡宏,潘怡,汪竟,朱玉贤。(2002)结核分枝杆菌三种分泌蛋白在原核表达载体中的克隆,表达与鉴定。《中国预防兽医学报》,5(24)325-330
13.
*蔡宏,潘怡,李国利,庄玉辉,朱玉贤,(2002)结核分枝杆菌多价核酸疫苗的构建及免疫原性。《科学通报》,47: 966-971. Cai Hong, Pan
Yi, Li Guoli, Zhuang Yuhui, Zhu Yuxian. (2002) Construction of multivalent DNA
vaccines for Mycobacterium tuberculosis and its immunogenicity. Chinese Science
Bulletin, 47(19): 1589-1593
14.
*Sheng-Jian Ji, Feng Liu, Er-Qiu Li, Yu-Xian Zhu. (2002)
Recombinant scorpion insectotoxin AaIT kills specifically insect cells but not
human cells. Cell research, 12(2): 143-150.
15.
*Shengjian Ji, Yingchun Lu, Jun Li, Gang Wei, Xiujuan Liang,
Yuxian Zhu. (2002) A b-tubulin-like
cDNA expressed specically in elongating cotton fibers induces longitudinal
growth of fission yeast. Biochemical and Biophysical Research Communications.
296 (5): 1245-1250.
16.
*Lu Yingchun, Wei Gang, Zhu Yuxian (2002) Clong whole
cellulose-synthesizing operon (ayacs Operon) from Acetobacter xylinum and
transforming it into cultivated cotton plants. Acta Botanica Sinica. 44:
441-445
17.
*Wang Dayong, Hu Shuang, Li Qing, Cui Keming and Zhu Yuxian
(2002) Photoperiod control of the apical bud and leaf senescence in pumpkin
strain 185. Acta Botanica Sinica. 44: 55-62
18.
*苏彦辉,曲红,Vincent Vachon,张杰,罗静初,Raynald Laprade, 朱玉贤(2002)苏云金芽孢杆菌Cry1Aa蛋白а4螺旋形成跨膜离子通道的昆虫毒性试验与模型预测。《中国科学》,32: 146-152。SuYanhui, Qu Hong, VACHON Vincent, Lu Jingchu, ZHANG
Jie, LAPRADE Raynald and Zhu Yuxian (2002) The toxicity test and
hypothetical model of Bacillus
thuringiensis Cry1Aa helix4. Science In China. 45: 561-567
19. 蔡宏,朱玉贤(2001)结核杆菌核酸疫苗的研究进展。中国预防兽医学进展,4:5-9。
20.
*徐华松,徐云剑,顾雪松,胡廷章,苏彦辉,朱玉贤(2001)豌豆乙酰羟酸还原异构酶基因的cDNA克隆、序列分析及其表达研究。科学通报,46:1022-1026。Xu Huasong, Xu
Yunjian, Gu Xuesong, Hu Tingzhang, Su Yanhui and Zhu Yuxian (2001) Cloning and
analysis of a cDNA encoding acetohydroxy acid isomeroreductase from G2 pea.
Chinese Science Bulletin, 46: 1808-1812. IF 0.511
21.
*Junli Zhou, Ligeng Ma, Suqiao Zhang, Yuxian Zhu, Daye Sun.
(2001) Extracellular calmodulin stimulates light-independent RbcS-GUS
expression in suspension-cultured cells of transgenic tobacco. Plant Cell
Physiol, 42: 1049-1055. IF 2.30
22.
*Guoying Jiang, Yunjian Xu, Xinsheng Zhu, Yanhui Su and Yuxian
Zhu (2001) Prokaryotically expressed Buthus martensii Karsch insect depressant
toxin has insecticidal effects. Toxicon.
39: 469-476. IF 1.366
23.
蔡宏,呼西旦,李淑霞,张玲,李君莲,许苗,朱玉贤(2001)利用PCR技术检测537份新疆结核病人痰标本中的结核分枝杆菌。中国人蓄共患病杂志,17: 65-67
24.
蔡宏, 李淑霞,呼西旦,李君莲,许苗,朱玉贤(2001)采用限制性酶切片段长度多样性(RFLP)和PCR指印技术对牛结核分支杆菌分裂研究。中国预防兽医学报,23:175-179
25.
*Huang Jianqiu, Wei Zhiming, An Hailong and Zhu Yuxian (2001)
Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of rice with the spider
insecticidal gene conferring resistance to leaffolder and striped stem borer.
Cell Research, 11: 149-155. IF 2.00
26.
*Yuxian Zhu, James M. Tepperman, Crag Fairchild and Peter H.
Quail (2000) Phytochrome B binds with greater apparent affinity than phychrome
A to the basic helix-loop-helix factor PIF3 in a reaction requiring the PAS
domin of PIF3. Proc. Natl. Acad.
Sci. 97:13419-13424
27.
*王学德,朱玉贤,季道蕃,蒋淑丽,李昱有(2000)棉纤维相关cDNA的克隆及其突变体中的结构变异。 科学通报,45: 1852-1857。Xuede Wang,
Yuxian Zhu, Daofan Ji, Shuli Jiang and Yuyou Li (2000) Cloning of cotton
fiber-related cDNA and its structure variants in four cotton fiber mutants.
Chinese Science Bulletin, 45: 1852-1857
28.
苏彦辉,徐云剑,顾雪松,刘天昀,朱玉贤 (2000) 用两步PCR法克隆全长cDNA。生物化学与分子生物学学报,16: 751-754
29. *胡廷章,徐云剑,江国英,朱玉贤(2000)转BmKIT4基因烟草的抗虫性。植物学报,42:732-735。Tingzhang Hu,
Yunjian Xu, Guoying Jiang and Yuxian Zhu (2000) Studies on
insect resistance of transgenic tobacco plants carrying the BMK IT4 gene. Acta Botanica Sinica,42:732-735