一种新的用于构建噬菌体抗体库的loxP突变体/Cre重组系统

甘愉1,2  赵新泰2*

 

1复旦大学上海医学院;2上海市肿瘤研究所分子与细胞免疫室,上海交通大学,上海200032,中国

 

摘要  loxP/Cre重组系统已成功地用于构建大库容的噬菌体抗体库,并从中筛选出多种人源性抗体。为了能在噬粒间有效地进行V区基因交换从而产生更多的VH-VL组合,我们需要2种不同的loxP位点。这2loxP相互之间不能进行重组,但自身loxP位点之间却能进行高效重组。loxP511是野生型loxP序列的突变体,其被普遍认为不能与野生型loxP进行重组,因此这2loxP被广泛地用于构建噬菌体抗体库。然而,我们的研究显示了loxP511能与野生型loxP进行重组,且重组效率较高。同时,我们还构建了一种新的loxP/Cre重组系统,其包括2种野生型loxP的突变体(loxP511loxP2272)和我们构建的Cre表达菌。并且通过实验证实该系统适用于构建大容量的噬菌体抗体库。

 

关键词  loxP突变体;重组系统;噬菌体抗体库

 

地址:    上海市肿瘤研究所分子与细胞免疫室

                上海市斜土路220025    200032

通讯作者:            赵新泰

                上海市肿瘤研究所分子与细胞免疫室

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