甘愉1,2 赵新泰2*
1复旦大学上海医学院;2上海市肿瘤研究所分子与细胞免疫室,上海交通大学,上海200032,中国
摘要 loxP/Cre重组系统已成功地用于构建大库容的噬菌体抗体库,并从中筛选出多种人源性抗体。为了能在噬粒间有效地进行V区基因交换从而产生更多的VH-VL组合,我们需要2种不同的loxP位点。这2种loxP相互之间不能进行重组,但自身loxP位点之间却能进行高效重组。loxP511是野生型loxP序列的突变体,其被普遍认为不能与野生型loxP进行重组,因此这2种loxP被广泛地用于构建噬菌体抗体库。然而,我们的研究显示了loxP511能与野生型loxP进行重组,且重组效率较高。同时,我们还构建了一种新的loxP/Cre重组系统,其包括2种野生型loxP的突变体(loxP511和loxP2272)和我们构建的Cre表达菌。并且通过实验证实该系统适用于构建大容量的噬菌体抗体库。
关键词 loxP突变体;重组系统;噬菌体抗体库
地址: 上海市肿瘤研究所分子与细胞免疫室
上海市斜土路2200弄25号 200032
通讯作者: 赵新泰
上海市肿瘤研究所分子与细胞免疫室
上海市斜土路2200弄25号 200032
电话:021-64046360
传真:021-64046360
电子信箱:[email protected]