摘要

研究转染了Bcl-XLsiRNAMGC-803细胞Bcl-XL基因的表达水平,观察细胞生物学行为的改变。构建GFPsiRNA质粒载体和GFP真核表达载体Ptrace共转染到人MGC-803细胞,荧光显微镜观察GFP的表达水平。构建Bcl-XLsiRNA和阴性siRNA质粒载体并稳定转染到人MGC-803细胞。RT-PCR和免疫荧光显微镜观察Bcl-XLmRNA和蛋白的表达。AO和流式细胞术观察细胞的自发凋亡。GFP真核表达载体和GFPsiRNA表达载体共转染48小时后,荧光显微镜结果表明转染GFPsiRNA组比阴性siRNAGFP的表达水平大大降低。RT-PCR和免疫荧光结果表明,Bcl-XLsiRNA转染组Bcl-XLmRNA和蛋白表达水平明显降低,而阴性siRNA转染组和未处理组没有观察到改变。AO观察到Bcl-XLsiRNA转染细胞凋亡形态学的改变,流式细胞术结果表明细胞有明显提高的亚G1峰。靶向GFPBcl-XLsiRNA能特异的抑制MGC-803细胞外源的GFP或内源的Bcl-XL的表达,并且Bcl-XLsiRNA能提高细胞自发的凋亡。特异靶向Bcl-XLsiRNA可能是针对胃腺癌的有效治疗途径。