应用cDNA微阵列分析技术对BNIPL-1过表达后的肝癌细胞系Hep3B基因表达谱分析

谢丽^1,2 覃文新^2,3 李锦军^2,3 何祥火² 舒惠群² 姚根富² 万大方^2,3 顾健人^2,3

¹复旦大学上海医学院，上海 200032

²上海市肿瘤研究所 癌基因及相关基因国家重点实验室 上海200032

³上海交通大学肿瘤研究所 上海200032

摘要 BNIPL-1（Bcl-2/adnovirus E1B 19 kD interacting protein 2 like-1）是本室经功能筛选获得的凋亡相关蛋白，它可以与Bcl-2 和Cdc42GAP相互作用，并通过BCH功能区诱导凋亡。本实验中，我们在Hep3B细胞中建立了受四环素调控过表达BNIPL-1的细胞株，通过western blot筛选BNIPL-1被高诱导表达的细胞株，MTS分析证明BNIPL-1的过表达可以抑制细胞增值。我们应用cDNA微阵列分析膜片检测了Hep3B-Tet-on细胞株中BNIPL-1诱导表达前后588个基因的表达谱，有15个基因表达发生改变，7个基因被上调，8个下调。生长抑制相关基因（p16-INK4、IL-12）或细胞凋亡相关基因（TRAIL、lymphotoxin-beta）被上调。细胞增值相关基因（PTN）被下调，半定量RT-PCR进一步验证了其中四个基因的不同表达。从本实验我们可以推测，BNIPL-1可能是通过TRAIL通路促进细胞凋亡，通过p16-INK4影响细胞周期，从而抑制细胞增殖。

关键词 BNIPL-1；四环素调控；cDNA微阵列分析；凋亡