SARS-CoV N 蛋白在昆虫细胞中的表达纯化及亚细胞定位
任爱霞1,2,谢幼华2,孔玉英2,杨冠珍2,张耀洲1, 3*,汪垣2*,吴祥甫2,3*
1浙江大学生命科学院生化所,杭州 310029; 2中国科学院上海生物化学与细胞研究所,上海 200031; 3浙江理工大学生化所, 杭州 310018
摘要 应用PCR技术克隆SARS冠状病毒BJ01株N蛋白基因,利用昆虫杆状病毒Bac-to-Bac表达系统表达了his融合的N蛋白,通过亲和层析进行了初步纯化,为N蛋白进一步功能研究提供条件。另外,利用共聚焦免疫荧光显微镜在昆虫细胞Trichoplusia ni BT1 Tn 5B1-4 (Tn 5B1-4)对表达的N蛋白进行定位,实验结果发现,N蛋白定位在细胞质和核仁中。
关键词 SARS; SARS冠状病毒; N蛋白; 杆状病毒; 昆虫细胞